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DNA提取产量高 检出流程严格 济南体液病原提取试剂盒
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南京兔牙生物科技有限公司
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关 键 词：济南体液病原提取试剂盒
行 业：化工 化学试剂
发布时间：2022-11-07
体液病原DNA提取试剂盒（磁珠法）适用于多种生物体液样本（如肺泡灌洗液、痰液、脑脊液等）及拭子样本的微生物DNA提取，可兼容上游经过去宿主核酸流程的样本。
DNA的分子生物学技术可以用于病源检测、遗传疾病检测、检测、系统进化、物种起源等常用的手段。目前的各种核酸分子生物学技术，包括荧光定量pcr、数字pcr、下一代测序等都获得了大量的进展。但是，这些技术检测结果良好都是以核酸纯化回收效率为前提的。好的DNA纯化技术，应当具备简便、安全、廉价的特点，且回收到的核酸应达到足够的浓度和纯度。
体液病原DNA提取试剂盒的产品特点：
1、不需要使用试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
2、节省时间，简捷，单个样品操作一般可在几十分钟内完成。
3、多次柱漂洗确保高纯度，提取的病毒DNA纯度高，质量稳定可靠，可适用于各种操作，包括PCR、酶切、杂交等。
体液病原DNA提取试剂盒的操作步骤：
1、取1.5ml离心管(自备)，加入20ul的Proteinase K溶液。
2、向离心管中加入200 ul血清或血浆，然后再加入200 ul BufferGB，涡旋震荡15 sec。
3、56°C孵育15 min，短暂离心，将管壁上的溶液收集到管底。
4、加入250ul无水乙醇，涡旋震荡15sec，室温放置5 min，短暂离心，将管壁上的溶液收集到管底。
5、将一个Spin Columns CG“放入Collection Tubes(2 m1) 中，将上一步所得溶液转移到离心吸附柱中，10 000 rpm离心30 sec，弃收集管中的废液。
6、向吸附柱内加入500ul 的Buffer GD，室温10 000 rpm离心30 sec，弃收集管中废液。
7、向吸附柱内加入500ul的Buffer PW，室温10000rpm 离心30 sec，弃收集管中废液。
8、向吸附柱中加入500ul 无水乙醇，10000 rpm离心30 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
9、室温12000rpm离心3min，甩干残留液体。
10、将离心吸附柱置于一个新的1.5 ml塑料离心管中，小心打开吸附柱的盖子，室温放置3 min,使吸附膜完全变干。加入30~ 100ul的洗脱液，室温放置2~ 5 min。12000 rpm离心1min，离心管底溶液即DNA。
体液病原DNA提取试剂盒的产品特点：
1、简便快速，较短时间内可获得高纯度的病原DNA。
2、*溶剂抽提，使用安全。
3、重复性好，产量高。
4、所得病毒DNA纯度高，污染物和抑制剂少，方便下游应用。
体液病原DNA提取试剂盒的操作步骤：
1、200μl血清等体液（需回复到室温，不足可用0.9%NaCl或者PBS补足）转入上述1.5ml离心管，加入400μl裂解液DLB，立刻涡旋振荡充分混匀。
2、室温(15-25℃)放置10分钟，每隔5分钟，振荡混匀一次。
3、加入450μl无水乙醇，立刻涡旋振荡充分混匀。如果周围环境**25℃，乙醇需要冰上预冷后再加入。
4、将上述混合物加入一个吸附柱AC中，（吸附柱放入收集管中）13000rpm离心30-60秒，倒掉收集管中的废液。如果总体积**过750μl，可分两次将溶液加入同一个吸附柱AC中。
5、加500μl去蛋白液RE，12000rpm离心30秒，弃废液。
6、加入500μl漂洗液WB，12000rpm离心30秒，弃废液，加入500μl漂洗液WB，重复一遍。
7、将吸附柱AC放回空收集管中，13000rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液，以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
8、取出吸附柱AC，放入一个新的离心管中，在吸附膜的中间部位加30-50μl洗脱缓冲液EB（事先在65－70℃水浴中加热效果更好），室温放置1分钟，12,000rpm离心1分钟。如果想得到较多量的DNA，可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，12,000rpm离心1分钟。洗脱体积越大，洗脱效率越高。如果需要的DNA浓度较高，可以适当减少洗脱体积，但是至小体积不应少于20μl，体积过小降低洗脱效率，减少DNA产量。
9、DNA可以存放在2-8℃，如果要较长时间存放，可以放置在－20℃。
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